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論文解讀--消毒劑對錦鯉皰疹病毒和病毒性出血性敗血癥病毒的作用

出處:水生動物健康評估公眾號 作者:吳凡 水產養殖網 2019-12-06 21:12:00

今天跟大家分享一篇文章:《消毒劑對錦鯉皰疹病毒和病毒性出血性敗血癥病毒的作用》,文章引用信息如下:
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生石灰是水產養殖中最常用的消毒劑之一,由于其能與水快速反應,導致溫度以及pH值迅速升高,是一種非常有效的消毒劑。但是,由于其腐蝕性極強,因此必須謹慎使用。大量使用生石灰會對水生動植物的生存產生影響。
 
過氧乙酸(PAA)是另一種常用的消毒劑。由于PAA的高反應活性,在使用后其濃度會迅速下降,尤其是在富含有機物的水中,因此,在計算劑量時必須考慮到水的成分和水溫等條件。
 
為了尋找一種可替代的,環保和有效的消毒劑,本研究測試了一種市售的蛋白酶(Neutrase®)對錦鯉皰疹病毒(KHV)和病毒性出血性敗血癥病毒(VHSV)的滅活作用。為了進行比較,測試了這些病毒顆粒在不同pH值,不同過氧乙酸和生石灰濃度(通常用于消毒)條件下的穩定性。將病毒懸浮液與各種濃度的不同試劑孵育24小時,并通過病毒滴定確定病毒顆粒的滴度。此外,還檢測了固體物質(石英砂)對消毒劑消毒效果的影響。

細胞培養基中KHV和VHSV的穩定性
實驗結果顯示兩種病毒在DMEM培養基中高溫條件下的穩定性大大降低。且在相同條件下,VHSV的穩定性高于KHV。
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細胞培養基對CaO緩沖能力的測定
實驗結果如表1所示,在超純水中,pH值隨溶液中CaO濃度的變化而變化,而在DMEM介質中,由于其較高的緩沖能力,僅在CaO濃度高于10–3 M時才會出現較大的pH值變化。因此,應在CaO濃度低于10–3 M的細胞培養基中進行滅活實驗。
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懸浮液中病毒顆粒的失活
實驗研究了pH、PAA、生石灰和蛋白水解酶Neutrase®在不同溫度下孵育24小時對KHV和VHSV感染性的影響。結果如圖2a-d所示。
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結果顯示:當pH值為10.5時,KHV和VHSV的滴定度至少降低了兩個數量級。當pH值低至3和4.5或高達12時,均未檢測到兩種病毒顆粒。
當PAA濃度≤0.01 vol.-%(pH值在6.9-7.3之間)時,兩種病毒的滴定度大約降低了兩個數量級。
當PAA濃度≥0.1 vol.-% 時,均未檢測到兩種病毒顆粒。

當CaO濃度低于0.01m時,KHV的滴度沒有降低。
當CaO濃度大于0.015m時,均未檢測到兩種病毒顆粒。

蛋白酶的處理使KHV病毒滴定度從最初的107 mU / ml降低到了104 mU / ml (3個數量級以上)。在蛋白水解活性為1 mU / ml的情況下,已經實現了VHSV的消毒(四個或更多的數量級),而8 mU / ml的Neutrase®已經能將兩種病毒的滴度降低到檢測極限以下。
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總結:
本研究所有實驗組都能夠將KHV和VHSV的滴度降低到滴定的檢測極限以下。盡管有必要進行進一步的研究,但這是蛋白酶用于滅活魚類病毒的首次報道,證明了蛋白酶具有很大的消毒潛力。

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